尊龙凯时仿制药质量一致性评价
“仿制药质量一致性评价”主要针对2007年新版《药品注册治理步伐》公布实验之前批准的口服仿制药 ，主要包括片剂、胶囊剂和颗粒剂等 ，举行质量再评价。评价要求考察海内企业生产的产品与原研产品在溶出度和有关物质等要害质量指标上是否一致。若是质量纷歧致 ，则要求企业对产品举行处方工艺刷新。
思量到海内仿制药质量大大都达不到原研产品的水平 ，因此“质量一致性评价”的详细营业一样平常包括两个部分：
1. 对企业产品的溶出度和有关物质与参比制剂举行比照 ，凭证研究数据判断两者质量是否一致。
2. 若是质量纷歧致 ，则需要凭证仿制药研发的要求 ，对该产品的处方工艺举行重新开发 ，将开发好的新处方工艺移交给企业并且支持企业举行申报。
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附征求意见稿全文：
1.通俗口服固体制剂参比制剂选择和确定指导原则（征求意见稿）
2.通俗口服固体制剂溶出曲线测定与较量指导原则（征求意见稿）
3.仿制药质量一致性评价人体生物等效性研究手艺指导原则（征求意见稿）
通俗口服固体制剂参比制剂选择和确定指导原则
一、概述
为推进仿制药与原研药品质量和疗效一致性评价事情的开展 ，凭证《国务院关于刷新药品医疗器械审评审批制度的意见》（国发〔2015〕44号）要求 ，制订本指导原则。
仿制药是指与被仿制药具有相同的活性因素、剂型、给药途径和治疗作用的药品。
参比制剂是指用于仿制药质量一致性评价的比照药品 ，可为原研药品或国际公认的同种药物。
原研药品是指在全球市场率先上市的 ，拥有或一经拥有相关专利、或获得了专利授权的原创性药品。
国际公认的同种药物是指在欧盟、美国获准上市并获得参比制剂职位的仿制药。
原研药品和国际公认的同种药物通常具有完善的临床研究数据或生物等效性研究数据。
本指导原则适用于通俗口服固体制剂仿制药质量一致性评价研究用参比制剂的选择与备案。
二、选择原则参比制剂首选原研药品 ，若确实无法获得原研药品或有证据证实原研药品不适合评价要领要求时 ，也可以选用国际公认的同种药物作为参比制剂。
（一）首选海内上市的原研药品作为参比制剂。如原研企业同时有入口和地产化药品的上市允许 ，优先选择入口原研药品作为参比制剂。若原研药品未在海内上市 ，可选择在外洋上市的原研药品。优先选择在欧盟、美国上市并被列为参比制剂的原研药品。
（二）国际公认的同种药物首选海内上市药品。如企业同时有入口和地产化药品的上市允许 ，优先选择入口药品作为参比制剂。若国际公认的同种药物未在海内上市 ，则选择在欧盟、美国上市并被列为参比制剂的同种药物。
（三）参比制剂的质量及均一性应知足药品评价要求。
三、爆发方法
（一）药品生产企业应凭证上述要求 ，明确所产仿制药的参比制剂 ，报食物药品羁系总局备案。
（二）行业协会可以组织同品种企业提出参比制剂的意见 ，报食物药品羁系总局审核确定。
（三）食物药品羁系总局可以推荐参比制剂 ，供药品生产企业参考。
四、备案和审核
（一）药品生产企业应凭证国家仿制药质量一致性评价的使命要求和拟评价品种的情形 ，开展先期研究 ，制订参比制剂 ，填写参比制剂备案申请表 ，报食物药品监视治理总局备案。食物药品监视治理总局若有异议 ，应当在接到备案文件20个事情日内作出。
（二）当参比制剂难以确准时 ，企业应将相关情形和建议报食物药品监视治理总局 ，经征询专家意见后审核确定。
（三）由行业协会提出和总局推荐的参比制剂 ，经征询专家意见后审核确定。
五、参比制剂的研究
（一）通过备案或审核确定的参比制剂 ，由企业自行购置 ，并对参比制剂开展研究。
（二）参比制剂应有正当或明确泉源 ，其批次和数目应知足企业仿制药质量一致性评价研究及药品磨练机构磨练复核的需求。
（三）企业应对参比制剂和仿制药开展周全临比研究。
通俗口服固体制剂溶出曲线测定与较量指导原则
一、概述
为进一步推进仿制药与原研药品质量和疗效一致性评价事情的开展 ，凭证《国务院关于刷新药品医疗器械审评审批制度的意见》（国发〔2015〕44号）要求 ，制订本指导原则。本指导原则适用于仿制药质量一致性评价中通俗口服固体制剂溶出曲线测定要领的建设和溶出曲线相似性的较量。
二、配景
固体制剂口服给药后 ，药物的吸收取决于药物从制剂中的溶出或释放、药物在心理条件下的消融以及在胃肠道的渗透等 ，因此 ，药物的体内溶出和消融对吸收具有主要影响。
体外溶出试验常用于指导药物制剂的研发、评价制剂批内批间质量的一致性、评价药品处方工艺变换前后质量和疗效的一致性等。
通俗口服固体制剂 ，可接纳较量仿制制剂与参比制剂体外多条溶出曲线相似性的要领 ，评价仿制制剂的质量。溶出曲线的相似并不料味着两者一定具有生物等效 ，但该法可降低两者泛起临床疗效差别的危害。
三、溶出试验要领的建设
溶出试验要领应能客观反应制剂特点、具有适当的迅速度和区分力� ？刹慰加泄匚南� ，相识药物的消融性、渗透性、pKa常数等理化性子 ，考察溶出装置、介质、搅拌速率和取样距离期等试验条件 ，确定相宜的试验要领。
（一）溶出仪
溶出仪需知足相关的手艺要求 ，应能够通过机械验证及性能验证试验。须要时 ，可对溶出仪举行适当改装 ，但需充分评价其须要性和可行性。溶出试验推荐使用桨法、篮法 ，一样平常桨法选择50～75转/分钟 ，篮法选择50～100转/分钟。在溶出试验要领建设的历程中 ，转速的选择推荐由低到高。若转速凌驾上述划定应提供充辩白明。
（二）溶出介质
溶出介质的研究应凭证药物的性子 ，充分思量药物在体内的情形 ，选择多种溶出介质举行 ，须要时可思量加入适量外貌活性剂、酶等添加物。
1.介质的选择
应考察药物在差别pH值溶出介质中的消融度 ，推荐绘制药物的pH-消融度曲线。在确定药物主因素稳固性知足测定要领要求的条件下 ，推荐选择不少于3种pH值的溶出介质举行溶出曲线考察 ，如选择pH值1.2、4.5和6.8的溶出介质。关于消融度受pH值影响大的药物 ，可能需在更多种pH值的溶出介质中举行考察。推荐使用的种种pH值溶出介质的制备要领见附件1。当接纳pH7.5以上溶出介质举行试验时 ，应提供充分的依据。水可作为溶出介质 ，但使用时应考察其pH值和外貌张力等因素对药物及辅料的影响。
2.介质体积
推荐选择500ml、900ml或1000ml。
（三）溶出曲线的测定
1.溶出曲线测准时间点的选择取样时间点可为5和/或10、15和/或20、30、45、60、90、120分钟 ，以后每隔1小时举行测定。
2.溶出曲线考察阻止时间点的选择以下任何一个条件均可作为考察阻止时间点选择的依据。
（1）一连两点溶出量均达85%以上 ，且差值在5%以内。a.一样平常在酸性溶出介质(pH1.0～3.0)中考察时间不凌驾2小时。（ ？）
（2）在其他各pH值溶出介质中考察时间不凌驾6小时。
（四）溶出条件的优化
在阻止时间内 ，药物在所有溶出介质中平均溶出量均达不到85%时 ，可优化溶出条件 ，直至泛起一种溶出介质抵达85%以上。优化顺序为提高转速 ，加入适量的外貌活性剂、酶等添加物。外貌活性剂浓度推荐在0.01％～1.0%(W/V)规模内依次递增 ，特殊品种可适度增添浓度。某些特殊药品的溶出介质可使用人工胃液和人工肠液。
（五）溶出要领的验证
要领建设后应举行须要的验证 ，如：准确度、细密度、专属性、线性、规模和耐用性等。
四、溶出曲线相似性的较量
溶出曲线相似性的较量 ，多接纳非模子依赖法中的相似因子（f2）法。该法溶出曲线相似性的较量是将受试样品的平均溶出量与参比样品的平均溶出量举行较量。平均溶出量应为12片（粒）的均值。盘算公式： Rt为t时间参比样品平均溶出量；Tt为t时间受试样品平均溶出量；n为取样时间点的个数。
（一）接纳相似因子（f2）法较量溶出曲线相似性的要求相似因子（f2）法最适合接纳3～4个或更多取样点且应知足下列条件：
1.应在完全相同的条件下对受试样品和参比样品的溶出曲线举行测定。
2.两条溶出曲线的取样点应相同。时间点的选取应尽可能以溶出量中分为原则 ，并兼顾整数时间点 ，且溶出量凌驾85%的时间点不凌驾1个。
3.第1个时间点溶出效果的相对标准误差不得过20% ，自第2个时间点至最后时间点溶出效果的相对标准误差不得过10%。
（二）溶出曲线相似性判断标准
1.接纳相似因子（f2）法较量溶出曲线相似性时 ，一样平常情形下 ，当两条溶出曲线相似因子（f2）数值不小于50时 ，可以为溶出曲线相似。
2.当受试样品和参比样品在15分钟的平均溶出量均不低于85%时 ，可以为溶出曲线相似。
五、其他
（一）溶出曲线相似性的较量应接纳同剂型、同规格的制剂。
（二）当溶出曲线不可接纳相似因子（f2）法较量时 ，可接纳其他相宜的较量法 ，但在使用时应给予充分论证。
附：溶出介质制备要领（略）
以上为推荐接纳的溶出介质配制要领 ，若有须要 ，研究者也可凭证详细情形接纳其他的溶出介质以及响应的配制要领。
仿制药质量一致性评价人体生物等效性研究手艺指导原则
一、概述
药物制剂要爆发最佳疗效 ，其药物活性因素应当在预期时间段内释放吸收并被转运到作用部位抵达预期的有用浓度。大大都药物是进入血液循环后爆发全身治疗效果的 ，作用部位的药物浓度和血液中药物浓度保存一定的比例关系 ，因此可以通过测定血液循环中的药物浓度来获得反应药物体内吸收水平和速率的主要药代动力学参数 ，间接展望药物制剂的临床治疗效果 ，以评价制剂的质量。允许这种展望的条件是制剂中活性因素进入体内的行为是一致并且可重现的。
生物使用度（Bioavailability,BA）是反应药物活性因素吸收进入体内的水平和速率的指标。已往泛起的一些由于制剂生物使用度差别而导致的不良事务 ，使人们熟悉到确有须要对制剂中活性因素生物使用度的一致性或可重现性举行验证 ，尤其是在含有相同活性因素的仿制产品要替换它的原研制剂进入临床使用的时间。鉴于药物浓度和治疗效果相关 ，假设在统一受试者 ，相同的血药浓度-时间曲线意味着在作用部位能抵达相同的药物浓度 ，并爆发相同的疗效 ，那么就可以药代动力学参数作为替换的终点指标来建设等效性 ，即生物等效性（Bioequivalence, BE）。BA和BE研究已经成为评价制剂质量的主要手段。
本指导原则将重点叙述BA和BE研究的相关看法、应用规模和BA和BE研究的设计、操作和评价等。
本指导原则主要是针对化学药品通俗固体口服制剂质量一致性评价的人体生物等效性研究。
由于在详细应用历程中有可能面临多种情形 ，关于一些特殊问题 ，仍应遵照详细问题详细剖析的原则。
二、BA和BE基本看法及应用
1.生物使用度：是指药物活性因素从制剂释放吸收进入全身循环的水平和速率。一样平常分为绝对生物使用度和相对生物使用度。绝对生物使用度是以静脉制剂（通常以为静脉制剂生物使用度为100%）为参比制剂获得的药物活性因素吸收进入体内循环的相对量；相对生物使用度则是以其他非静脉途径给药的制剂（如片剂和口服溶液）为参比制剂获得的药物活性因素吸收进入体循环的相对量。
2.生物等效性：是指药学等效制剂或可替换药物在相同试验条件下 ，服用相同剂量 ，其活性因素吸收水平和速率的差别无统计学意义。通常意义的BE研究是指用BA研究要领 ，以药代动力学参数为终点指标 ，凭证预先确定的等效标准和限度举行的较量研究。在药代动力学要领确实不可行时, 也可以思量以临床综合疗效、药效学指标或体外试验指标等举行较量性 研究 ，但需充分证实所接纳的要领具有科学性和可行性。
相识以下几个看法将有助于明确 BA和BE：
原研药（Innovator Product）：是指已经由周全的药学、药理学和毒理学研究以及临床研究数据证实其清静有用性并首次被批准上市的药品。
药学等效性(Pharmaceutical equivalence)：若是两制剂含等量的相同活性因素 ，具有相同的剂型 ，切条约样的或可较量的质量标准 ，则可以以为它们是药学等效的。药学等效纷歧定意味着生物等效 ，由于辅料的差别或生产工艺差别等可能会导致药物溶出或吸收行为的改变。
治疗等效性(Therapeutic equivalence)：若是两制剂含有相同活性因素 ，并且临床上显示具有相同的清静性和有用性 ，可以以为两制剂具有治疗等效性。若是两制剂中所用辅料自己并不会导致有用性和清静性问题 ，生物等效性研究是证实两制剂治疗等效性最合适的步伐。若是药物吸收速率与临床疗效无关,吸收水平相同但吸收速率差别的药物也可能抵达治疗等效。而含有相同的活性因素只是活性因素化学形式差别（如某一化合物的盐、酯等）或剂型差别（如片剂和胶囊剂）的药物制剂也可能治疗等效。
基内情似药物（Essentially similar product）：若是两个制剂具有等量且切条约一质量标准的药物活性因素 ，具有相同剂型 ，并且经由证实具有生物等效性,则两个制剂可以以为是基内情似药物。从广义上讲 ，这一看法也应适用于含统一活性因素的差别的剂型 ，如片剂和胶囊剂。与原研药基内情似药物是可以替换原研药使用的。
BA和BE均是评价制剂质量的主要指标 ，BA强调反应药物活性因素抵达体内循环的相对量和速率 ，是新药研究历程中选择合适给药途径和确定用药计划(如给药剂量和给药距离)的主要依据之一。BE则重点在于以预先确定的等效标准和限度举行的较量 ，是包管含统一药物活性因素的差别制剂体内行为一致性的依据 ，是判断后研发产品是否可替换已上市药品使用的依据。
BA和BE研究在药品研发的差别阶段有差别作用：在新药研究阶段 ，为了确定新药处方、工艺合理性 ，通常需要较量改变上述因素后制剂是否能抵达预期的生物使用度；开发了新剂型 ，要对拟上市剂型举行生物使用度研究以确定剂型的合理性 ，通过与原剂型较量的BA研究来确定新剂型的给药剂量 ，也可通过BE研究来证实新剂型与原剂型是否等效；在临床试验历程中 ，可通过BE研究来验证统一药物的差别时期产品的前后一致性 ，如：早期和晚期的临床试验用药品 ，临床试验用药品（尤其是用于确定剂量的试验药）和拟上市药品等。在仿制生产已有国家标准药品时 ，可通过BE研究来证实仿制产品与原研药是否具有生物等效性 ，是否可与原研药替换使用。
药品批准上市后 ，如处方组成因素、比例以及工艺等泛起一定水平的变换时 ，研究者需要凭证产品转变的水平来确定是否举行BE研究 ，以考察变换后和变换前产品是否具有生物等效性。以提高生物使用度为目的研发的新制剂 ，需要举行BA研究 ，相识变换前后生物使用度的转变。
三、研究要领
BE研究是在试验制剂和参比制剂生物使用度较量基础上建设等效性。现在推荐的生物等效性研究要领包括体内和体外的要领。按要领的优先思量水平从高到低排列：药代动力学研究要领、药效动力学研究要领、临床较量试验要领、体外研究要领。详细如下：
药代动力学研究：即接纳人体生物使用度较量研究的要领。通过丈量差别时间点的生物样本（如全血、血浆、血清或尿液）中药物浓度 ，获得药物浓度-时间曲线（Concentration-Time curve, C-T）来反应药物从制剂中释放吸收到体循环中的动态历程。并经由适当的数据 ，得出与吸收水平和速率有关的药代动力学参数如曲线下面积（AUC）、达峰浓度（Cmax）、达峰时间（Tmax）等 ，通过统计学较量以上参数 ，判断两制剂是否生物等效。
药效动力学研究：在无可行的药代动力学研究要领建设生物等效性研究时（如无迅速的血药浓度 检测要领、浓度和效应之间不保存线性相关） ，可以思量用明确的可分级定量的人体药效学指标通过效应-时间曲线（Effect-Time curve）与参比制剂较量来确定生物等效性。
临床较量试验：当无相宜的药物浓度检测要领 ，也缺乏明确的药效学指标时 ，也可以通过以参比制剂为比照的临床较量试验 ，以综合的疗效终点指标来验证两制剂的等效性。然而 ，作为生物等效研究要领 ，比照的临床试验可能由于样本量缺乏或检测指标不迅速而缺乏足够的掌握度去磨练差别 ，故建议只管接纳药代动力学研究要领。通过增添样本量或严酷的临床研究实验在一定水平上可以战胜以上局限。
体外研究：一样平常不提倡用体外的要领来确定生物等效性 ，由于体外并不可完全取代体内行为 ，但在某些情形下 ，如能提供充分依据 ，也可以接纳体外的要领来证实生物等效性。凭证生物药剂学分类证实属于高消融度 ，高渗透性 ，快速溶出的口服制剂可以接纳体外溶出度较量研究的要领验证生物等效 ，由于该类药物的溶出、吸收已经不是药物进入体内的限速办法。关于难溶性但高渗透性的药物 ，如已建设优异的体内外相关关系 ，也可用体外溶出的研究来替换体内研究。
四、BE研究详细要求
以药代动力学参数为终点指标的研究要领是现在普遍接纳的生物等效性研究要领。一个完整的生物等效性研究包括生物样天职析、实验设计、统计剖析、效果评价四个方面内容。
（一）生物样天职析要领的建设和确证生物样品一样平常来自全血、血清、血浆、尿液或其他组织 ，具有取样量少、药物浓度低、滋扰物质多以及个体的差别大等特点 ，因此必需凭证待测物的结构、生物介质和预期的浓度规模 ，建设相宜的生物样品定量剖析要领 ，并对要领举行确证。1.常用剖析要领 现在常用的几种剖析要领有：
（1）色谱法：气相色谱法(GC)、高效液相色谱法(HPLC)、色谱－质谱联用法（LC－MS、LC-MS-MS、GC-MS、GC-MS-MS）等 ，可用于大大都药物的检测；
（2）免疫学要领：放射免疫剖析法、酶免疫剖析法、荧光免疫剖析法等 ，多用于卵白质多肽类物质检测；
（3）微生物学要领：可用于抗生素药物的测定。生物样天职析要领的选择宜只管选择可行的迅速度高的要领。
2.要领学确证（Method Validation）
建设可靠的和可重现的定量剖析要领是举行生物等效性研究的要害之一。为了包管剖析要领可靠 ，必需举行充分的要领确证 ，一样平常应举行以下几方面的考察：
2.1 特异性(Specificity)
特异性是指样品中保存滋扰因素的情形下 ，剖析要领能够准确、专一地测定剖析物的能力。必需提供证实所测定物质是受试药品的真相药物或特定活性代谢物 ，生物样品所含内源性物质和响应代谢物、降解产品不得滋扰对样品的测定 ，若是有几个剖析物 ，应包管每一个剖析物都不被滋扰。应确定包管剖析要领特异性的最佳检测条件。关于色谱法至少要考察6个来自差别个体的空缺生物样品色谱图、空缺生物样品外加比照物质色谱图（注明浓度）及用药后的生物样品色谱图反应剖析要领的特异性。关于以软电离质谱为基础的检测法（LC－MS、LC-MS-MS）应注重考察剖析历程中的介质效应 ，如离子抑制等。
2.2 标准曲线和定量规模（Calibration Curve）
标准曲线反应了所测定物质浓度与仪器响应值之间的关系 ，一样平常用回归剖析要领（如用加权最小二乘法）所得的回归方程来评价。应提供标准曲线的线性方程和相关系数 ，说明其线性相关水平。标准曲线崎岖浓度规模为定量规模 ，在定量规模内浓度测定效果应抵达试验要求的细密度和准确度。配制标准样品应使用与待测样品相同生物介质 ，差别生物样品应制备各自的标准曲线 ，用于建设标准曲线的标准浓度个数取决于剖析物可能的浓度规模和剖析物/响应值关系的性子。必需至少用6个浓度建设标准曲线 ，关于非线性相关可能需要更多浓度点。定量规模要能笼罩所有待测的生物样品浓度规模 ，不得用定量规模外推的要领求算未知样品的浓度。建设标准曲线时应随行空缺生物样品 ，但盘算时不包括该点 ，仅用于评价滋扰。标准曲线各浓度点的实测值与标示值之间的误差*在可接受的规模之内时 ，可判断标准曲线及格� ？山邮芄婺Ｒ谎匠；ㄎ畹团ǘ鹊愕奈蟛钤凇�20%以内 ，其余浓度点的误差在±15%以内。只有及格的标准曲线才华对临床待测样品举行定量盘算。当线性规模较宽的时间 ，推荐接纳加权的要领对标准曲线举行盘算 ，以使低浓度点盘算得较量准确。（注：*误差=【（实测值－标示值）/标示值】X100%）
2.3 定量下限（Lower Limit of quantitation ，LLOQ）定量下限是标准曲线上的最低浓度点 ，体现测定样品中切合准确度和细密度要求的最低药物浓度。LLOQ应能知足测定3～5个消除半衰期时样品中的药物浓度或能检测出Cmax的1／10～1/20时的药物浓度。其准确度应在真实浓度的80%～120%规模内 ，相对标准差(RSD)应小于20%。应至少由5个标准样品测试效果证实。
2.4 细密度与准确度(Precision and Accuracy)细密度是指在确定的剖析条件下 ，相同介质中相同浓度样品的一系列丈量值的疏散水平。通常用质控样品的批内和批间RSD来考察要领的准确度。一样平常RSD应小于15％ ，在LLOQ周围 RSD应小于20％。准确度是指在确定的剖析条件下 ，测得的生物样品浓度与真实浓度的 靠近水平(即质控样品的实测浓度与真实浓度的误差) ，重复测定已知浓度剖析物样品可获得准确度。一样平常应85％～115％规模内 ，在LLOQ周围应在80％～120％规模内。一样平常要求选择高、中、低3个浓度的质控样品同时举行要领的细密度和准确度考察。低浓度选择在LLOQ的3倍以内 ，高浓度靠近于标准曲线的上限 ，中心选一个浓度。在测定批内细密度时 ，每一浓度至少制备并测 定5个样品。为获得批间细密度应至少在差别天一连制备并测定3个及格的剖析批(Analytical run/Analytical batch) ，至少45个样品。
2.5 样品稳固性(Stability)
凭证详细情形 ，对含药生物样品在室温、冰冻或冻融条件下以及差别存放时间举行稳固性考察 ，以确定生物样品的存放条件和时间�；褂ψ⒅乜疾齑⒈敢旱奈裙绦砸约把反χ贸头：蟮娜芤褐衅饰鑫锏奈裙绦� ，以包管检测效果的准确性和重现性。
2.6 提取接纳率
从生物样本基质中接纳获得剖析物质的响应值除以纯标准品爆发的响应值即为剖析物的提取接纳率。也可以说是将供试生物样品中剖析物提取出来供剖析的比例。应考察高、中、低3个浓度的提取接纳率 ，其效果应当细密和可重现。
2.7 微生物学和免疫学要领确证
上述剖析要领确证主要针对色谱法 ，许多参数和原则也适用于微生物学或免疫学剖析 ，但在要领确证中应思量到它们的一些特殊之处。微生物学或免疫学剖析的标准曲线实质上是非线性的 ，以是应尽可能接纳比化学剖析更多的浓度点来建设标准曲线。效果的准确度是要害的因素 ，若是重复测定能够改善准确度 ，则应在要领确证和未知样品测定中接纳同样的办法。
3.要领学质控
只有在生物样天职析要领确证完成之后才华最先测定未知样品。在测定生物样品中的药物浓度时应举行质量控制 ，以包管所建设的要领在现实应用中的可靠性。推荐由自力的职员配制差别浓度的质控样品对剖析要领举行审核。
每个未知样品一样平常测定一次 ，须要时可举行复测。生物等效性试验中 ，来自统一个体的生物样品最幸亏统一批中测定。每个剖析批生物样品测准时应建设新的标准曲线 ，并随行测定高、中、低三个浓度的质控样品。每个浓度至少双样本 ，并应匀称漫衍在未知样品测试顺序中。当一个剖析批中未知样品数目较多时 ，应增添各浓度质控样品数 ，使质控样品数大于未知样品总数的5%。质控样品测定效果的误差一样平常应小于15% ，低浓度点误差一样平常应小于20% ，最多允许1/3的质控样品效果凌驾上述限度 ，但不可泛起在统一浓度质控样品中。如质控样品测定效果不切合上述要求 ，则该剖析批样品测试效果作废。
浓度高于定量上限的样品 ，应接纳响应的空缺介质稀释后重新测定。关于浓度低于定量下限的样品 ，在举行药代动力学剖析时 ，在抵达Cmax以前取样的样品应以零值盘算 ，在抵达Cmax以后取样的样品应以无法定 量（Not detectable, ND）盘算 ，以减小零值对AUC盘算的影响。
4.剖析数据的纪录与生涯剖析要领的有用性应通过实验证实。在临床报告中 ，应提供完成这些实验事情的相关的详细资料。建设一样平常性和特殊性标准操作规程、生涯完整的实验纪录是剖析要领有用性的基本要素。生物剖析要领建设中爆发的数据和质控样品测试效果应所有纪录并妥善生涯 ，并提供足够的可供评价的要领学建设和样品剖析的数据。至少应当提供的数据包括：
4.1 要领建设的数据
剖析要领的详细形貌；仪器装备、剖析条件；该要领所用比照品（被 测药物、代谢物、内标物）的纯度和泉源；形貌测定特异性、准确度、细密度、接纳率、定量限、标准曲线的实验并给出获得的主要数据列表；列出批内批间细密度和准确度的详细效果；形貌稳固性考察及相关数据；凭证详细情形提供代表性的色谱图或质谱图并加以说明。
4.2 样品剖析的数据
样品处置惩罚和生涯的情形；剖析样品时标准曲线列表；用于盘算效果的回归方程；各剖析批质控样品测定效果综合列表并盘算批内和批间细密度、准确度；各剖析批包括的未知样品浓度盘算效果。提供100%受试者样品测试的色谱图复印件 ，包括响应剖析批的标准曲线和质控样品的色谱图复印件。注明缺失样品的缘故原由 ，重复测试的效果。对舍弃任何剖析数据和选择所报告的数听说明理由。
4.3 其他相关信息
项目编号、剖析要领编号、剖析要领类型、剖析要领确证举行简化的理由、以及响应的项目妄想编号、问题等。
（二）实验设计与操作
1. 交织设计
交织设计是现在应用最多最广的要领 ，由于大都药物吸收和扫除在个体之间均保存很大变异 ，个体间的变异系数远远大于个体内变异系数 ，因今生物等效性研究一样平常要求按自身交织比照的要领设计。把受试工具随机分为几组 ，按一定顺序处置惩罚 ，一组受试者先服用受试制剂 ，后服用参比制剂；另一组受试者先服用参比制剂 ，后服用受试制剂。两顺序间应有足够长的距离时间 ，为洗濯期（Wash-out Period）。这样 ，对每位受试者都一毗邻受两次或更多次的处置惩罚 ，相当于自身比照 ，可以将制剂因素对药物吸收的影响与其他因素区脱离来 ，镌汰了差别试验周期和个体间差别对试验效果的影响。
凭证试验制剂数目差别一样平常接纳2×2交织、3×3交织等设计。若是是两种制剂较量 ，双处置惩罚、双周期 ，两序列的交织设计是较好的选择。如试验包括3个制剂（受试制剂2个和参比制剂1个）时 ，宜接纳3制剂3周期二重3×3拉丁方试验设计。各周时代也应有足够的洗濯期。设定洗濯期是为了消除两制剂的相互滋扰 ，阻止上个周期内的处置惩罚影响到随后一周期的处置惩罚中。洗濯期一样平常不应短于7个消除半衰期。但有些药物或其活性代谢物半衰期很长时则难以按此要领设计实验 ，在此情形下可能需要思量按平行组设计举行 ，但样本量可能要增添。而关于某些高变异性药物（Highly Variable Drug） ，凭证详细情形 ，除接纳增添例数的步伐外 ，可接纳重复交织设计 ，对统一受试者两次接受统一制剂时可能保存的个体内差别举行测定。
2.受试者的选择
2.1 受试者入选条件：受试者的选择应当只管使个体间差别减到最小 ，以便能检测出制剂间的差别。试验计划中应明确入选和剔除条件。一样平常情形应选择男性康健受试者。特殊作用的药品 ，则应凭证详细情形选择适当受试者。选择康健女性受试者应阻止有身的可能性。如待测药物保存已知的不良反应 ，可能带来清静性担心 ，也可思量选择患者作为受试者。年岁:一样平常18～40周岁 ，统一批受试者年岁不宜相差10岁以上。体重：正常受试者的体重一样平常不应低于50kg。按体质指数(Body MassIndex , BMI)＝体重（kg）／身高2（m2）盘算 ，一样平常应在标准体重规模内。统一批受试者体重（kg）不宜悬殊过大 ，由于受试者服用的药物剂量是相同的。受试者应经由周全体检 ，身体康健 ，无心、肝、肾、消化道、神经系统、精神异常及代谢异常等病史；体格检查示血压、心率、心电图、呼吸状态、肝、肾功效和血象无异常 ，阻止药物体内历程受到疾病滋扰。凭证药物种别和清静性情形 ，还应在试验前、试验时代、试验后举行特殊项目检查 ，如降糖药应检查血糖水平。为阻止其他药物滋扰 ，试验前两周内及试验时代禁服任何其他药物。实验时代禁烟、酒及含咖啡因的饮料 ，或某些可能影响代谢的果汁等 ，以免滋扰药物体内代谢。受试者应无烟、酒嗜好。若有吸烟史 ，在讨论效果时应思量可能的影响。 如已知药物保存遗传多态性导致代谢差别 ，应思量受试者由于慢代谢可能泛起的清静性等问题。
2.2 受试者例数受试者例数应当切合统计学要求 ，关于现在的统计要领, 18—24例可知足大大都药物对样本量的要求 ，但对某些变异性大的药物可能需要适当增添例数。一个临床试验的例数几多是由三个基本因素决议的：
（1）显著性水平：即α值的巨细 ，通常取 0.05 或 5%；
（2）掌握度：即1-β值的巨细 ，一样平常定为不小于 80% ，其中β是犯第Ⅱ类过失的概率 ，也就是把现实有用误判为无效的概率；
（3）变异性（CV%）和差别（θ）：两药等效性磨练中检测指标的变异性和差别越大所需例数越多。在试验前并不知道θ和CV% ，只能凭证已有的参比制剂的上述参数来估算或举行预试验。另外 ，当一个生物使用度试验完成后 ，可以凭证θ、CV%和掌握度等参数来求N值 ，并与试验所选择例数举行比照 ，磨练试验所接纳例数是否合适。
2.3 受试者分组
必需接纳随神秘领分组 ，各组间应具有可比性。
3.受试制剂和参比制剂(Test Product and Reference Product ,T and R )
参比制剂的质量直接影响生物等效性试验效果的可靠性 ，参比制剂的选择应遵照总局仿制药质量一致性评价事情办公室宣布的相关指导原则的要求。参比制剂和受试制剂含量差别不可凌驾5%。
关于受试制剂 ，应为切合现行质量标准的中试/生产规模的产品。应提供该制剂的体外溶出度、稳固性、含量或效价测定、批间一致性报告等 ，供试验单位参考。个体药物尚需提供多晶型及光学异构体的资料。参比制剂和受试制剂均应注明研制单位、批号、规格、生涯条件、有用期。
试验竣事后受试制剂和参比制剂应保存足够长时间直到产品一致性评价以备查。
4.给药剂量
举行药物制剂生物使用度和生物等效性研究时 ，给药剂量一样平常应与临床单次用药剂量一致 ，不得凌驾临床推荐的单次最大剂量或已经证实的清静剂量。受试制剂和参比制剂一样平常应服用相等剂量 ，需要使用不相等剂量时 ，应说明理由并提供所用剂量规模内的线性药代动力学特征依据 ，效果可以剂量校正方法盘算生物使用度。
一样平常情形下通俗制剂仅举行单剂量给药研究即可,但在某些情形下可能需要思量举行多次给药研究 ，如：（1）受试药单次服用后真相药或活性代谢物浓度很低 ，难以用响应剖析要领细密测定血药浓度时；（2）受试药的生物使用度有较大个体差别；（3）药物吸收水平相差不大 ，但吸收速率有 较大差别；（4）缓控释制剂。举行多次给药研究应按临床推荐的给药计划给药 ，至少一连3次测定谷浓度确定血药浓度达稳态后选择一个给药距离取样举行测定 ，并据此盘算生物使用度。
5.取样
取样点的设计对包管试验效果可靠性及药代动力学参数盘算的合理性 ，均有十分主要的意义。通常应有预试验或参考海内外的药代文献 ，为合理设计采样点提供依据。应用血药浓度测定法时 ，一样平常应兼顾到吸收相、平衡相（峰浓度）和消除相。
在药物浓度—时间曲线各时相及预计达峰时间前后应有足够采样点 ，使浓度—时间曲线能周全反应药物在体内处置惩罚的全历程。服药前应先取空缺血样。一样平常在吸收相部分取2—3个点 ，峰浓度周围至少需要3个点 ，消除相取3—5个点。只管阻止第一个点即为Cmax ，预试验将有助于阻止这个问题。采样一连到受试药真相或其活性代谢物3～5个半衰期时 ，或至血药浓度为Cmax的1/10～1/20, AUC0-t/AUC0-∞通常应当大于80%。关于长半衰期药物 ，应尽可能取样一连到足够较量完整的吸收历程 ，由于最后消除项对该类制剂吸收历程的评价影响不大。多次给药研究中 ，关于一些已知生物使用度受昼夜节律影响的药物 ，则应该一连24小时取样。
当受试药不可用血药浓度测定要领举行生物使用度检测时 ，若该药真相或活性代谢物主要由尿渗透（大于给药剂量的70%） ，可以思量尿药法测定 ，以尿样中药物的累积渗透量来反应药物摄入量。
试验药品和试验计划
应当切合生物使用度测定要求。尿样的网络接纳分段网络法,其收罗频度、距离时间应知足估算受试药真相药或活性代谢物经尿的渗透水平。但该要领不可反应药物吸收速率 ，误差因素较多 ，一样平常不提倡接纳。某些药物在体内迅速代谢无法测定生物样品中真相药物 ，也可接纳测定生物样品中主要代谢物浓度的要领 ，举行生物使用度和生物等效性试验。
6.药代动力学参数盘算
一样平常用非房室数学模子剖析要领来估算药代动力学参数。用房室模子要领估算药代参数时 ，接纳差别的要领或软件其值可能有较大差别。研究者可凭证详细情形选择使用 ，但所用软件必需经确证并应在研究报告中注明所用软件。在生物等效性研究中 ，其主要丈量参数Cmax和Tmax均以实 测值体现。AUC0→t以梯形法盘算 ，故受数据处置惩罚程序影响不大。
7.研究历程标准化
整个研究历程应当标准化 ，以使得除制剂因素外 ，其他种种因素导致的体内药物释放吸收差别镌汰到最小 ，包括受试者的饮食、运动都应控制。试验事情应在I期临床试验视察室举行。受试者应获得医护职员的监护。受试时代爆发的任何不良反应 ，均应实时处置惩罚和纪录 ，须要时阻止试验。
（三）数据处置惩罚及统计剖析
1.数据表达BA和BE研究必需提供所有受试者各个时间点受试制剂和参比制剂的 药物浓度测定命据、每一时间点的平均浓度（Mean）及其标准差（SD）和相对标准差（RSD） ，提供每个受试者的浓度—时间曲线（C-T曲线）清静均C-T曲线以及C-T曲线各个时间点的标准差。不可随意剔除任何数据。脱落者的数据一样平常不可用其他数据替换。
2.药代动力学参数
2.1 单次给药的BA和BE研究 ，提供所有受试者服用受试制剂和参比制剂的AUC0→t ，AUC0→∞、Cmax、Tmax、t1/2、CL、Vd、F等参数及其平均值和标准差。 Cmax和Tmax均以实测值体现。AUC0→t以梯形法盘算；AUC0→∞按公式盘算：AUC0→∞＝AUC0→t＋Ct/λz（t为最后一次可实测血药浓度的采样时间；Ct为末次可测定样本药物浓度；λz系对数浓度-时间曲线最后直线部份求得的最后消除速率常数 ，可用对数浓度-时间曲线最后直线部分的斜率求得；t1/2用公式 t1/2＝0.693／λz盘算。以各个受试者受试制剂（T）和参比制剂（R）的AUC0→t按下式划分盘算其相对生物使用度（F）值：当受试制剂和参比制剂剂量相同时：F＝AUCT／AUCR×100％ 受试制剂和参比制剂剂量差别时 ，若受试药物具备线性药代动力学特征 ，可按下式以剂量予以校正：F＝【AUCT×DR／AUCR×DT】×100％（AUCT、AUCR 划分为T和R的AUC；DR、DT划分为T和R的剂量）。
2.2 关于多次给药的BA和BE研究 ，提供受试制剂和参比制剂的三次谷浓度数据（Cmin） ，达稳态后的AUCss Css-max、Css-min 、T ss-max、t1/2、F、DF等参数。当受试制剂与参比制剂剂量相等时 ，F值按下式盘算：F＝AUCss T／AUCss R×100％（式中AUCss T和AUCss R 划分为T和R稳态条件下的AUC）3.统计剖析
3.1 对数转换
评价BE的药代动力学参数AUC0→t和Cmax在举行等效性磨练前必需尴尬刁难数转换。当数据有偏倚时经对数转换可校正其对称性。别的,统计中数据比照宜用比值法而不必差值法,通过对数转换,可实现将均值之比置信区间转换为对数形式的均值之差的盘算。
3.2 等效判断标准目今普遍接纳主要药代参数经对数转换后以多因素方差分 析（ANOVA）举行显著性磨练 ，然后用双单侧t磨练和盘算90％置信区间的统计剖析要领来评价和判断药物间的生物等效性。方差磨练是显著性磨练 ，设定的无效假设是两药无差别 ，磨练方法为是与否 ，在P<0.05时以为两者差别有统计意义 ，但纷歧定不等效；P>0.05时以为两药差别无统计意义 ，但P>0.05并不可以为两者相等或相近。在生物使用度试验中 ，接纳多因素方差剖析（ANOVA）举行统计剖析 ，以判断药物制剂间、个体间、周时代和服药顺序间的差别。在生物等效性实验中 ，方差剖析可提醒误差泉源 ，为双单侧t磨练盘算提供了误差值（MSE）。
双单侧t磨练及（1－2α）%置信区间法是现在生物等效磨练的唯一标准。双向单侧t磨练是等效性磨练 ，设定的无效假设是两药不等效 ，受试制剂在参比制剂一定规模之外 ，在P<0.05时说明受试制剂没有凌驾划定的参比制剂的高限和低限 ，拒绝无效假设 ，可以为两药等效。
（1－2α）%置信区间是双单侧t磨练另一种表达方法。其基来源理是在高、低2个偏向对受试制剂的参数均值与崎岖界值之间的差别划分作单侧t磨练 ，若受试 制剂均数在高偏向没有大于即是参比制剂均数的125％（P＜0.05） ，且在低偏向也没有小于即是参比制剂均数的80％（P＜0.05） ，即在两个偏向的单侧t磨练 ，都能以95％的置信区间确认没有凌驾划定规模 ，则可以为受试制剂与参比制剂生物等效。
等效判断标准 ，一样平常划定 ，经对数转换后的受试制剂的 AUC0→t在参比制剂的80％—125％规模 ，受试制剂的Cmax在参比制剂的80％—125％规模。凭证双单侧磨练的统计量 ，同时求得（1－2α）%置信区间 ，如在划定规模内 ，即可有1－2α的概率判断两药生物等效。若有须要时 ，应对Tmax经非参数法磨练 ，如无差别 ，可以认定受试制剂与参比制剂生物等效。
（四）效果评价
生物等效性是指一种药物的差别制剂在相同的实验条件下 ，给予相同剂量 ，其吸收水平和吸收速率没有显着差别。故对受试制剂与参比制剂的生物等效性评价 ，应从药物吸收水平和吸收速率两方面举行 ，评价反应这两方面的3个药代动力学参数即 AUC0→t、Cmax和Tmax是否切合前述等效标准。现在较量一定AUC对药物吸收水平的权衡作用 ，而Cmax、Tmax依赖取样时间的安排 ，用它们权衡吸收速率有时是不敷准确的 ，不适适用于具有多峰征象的制剂及个体变异大的实验。故在评价时 ，若泛起某些不等效特殊情形 ，需详细问题加以详细剖析。
关于 AUC ，一样平常要求90％可信区间在80％—125％规模内。关于治疗窗窄的药物 ，这个规模可能应适当缩小 ，而在少少数情形下 ，若是经临床证实合理的情形下 ，也可以适当放宽规模。对 Cmax也是云云。而关于Tmax ，一样平常在释放快慢与临床疗效和清静性亲近相关时需要统计评价 ，其等效规模可凭证临床要求来确定。关于泛起受试制剂生物使用度高于参比制剂的情形 ，即所谓超生物使用 ，可以思量两种情形：
1）参比制剂是否自己生物使用度低的产品 ，因而受试制剂体现出生物使用度相对较高；
2）参比制剂质量切合要求 ，受试制剂确实超生物使用度。效果的评价应连系研究目的出发 ，举行生物等效性评价的目的提供两制剂可替换使用的依据；举行生物使用度研究 ，则主要剖析获得的相对生物使用度数值进一步指导确定新剂型的临床使用剂量。
（五）BE研究报告内容为了知足评价的需求 ，一份生物等效性研究临床报告内容至少应包括以下内容：
（1）实验目的；
（2）生物样天职析要领的建设和考察的数据 ，提供须要的图谱；
（3）详细的实验设计和操作要领 ，包括所有受试者的资料、样本例数、参比制剂、给药剂量、服药要领和采样时间安排；
（4）原始测定未知样品浓度所有数据 ，每个受试者药代参数和药时曲线；
（5）接纳的数据处置惩罚程序和统计剖析要领以及详细统计历程和效果；
（6）服药后的临床不良反应视察效果 ，受试者中途退出和脱落纪录及缘故原由；
（7）生物使用度或生物等效性效果剖析以及讨论；
（8）参考文献。正文前应有简短摘要；正文末 ，应注明实验单位、研究认真人、加入实验职员 ，并署名盖章 ，以示对研究效果认真。
五、复方制剂
对复方化学药品制剂生物等效性研究 ，一样平常情形下某一因素的体内行为不可说明其他因素的体内行为 ，故原则上应证实每一个有用因素的生物等效性。试验设计时应只管兼顾各个因素的特点。
六、结语
生物使用度和生物等效性研究只是作为一个验证制剂质量的要领学手段。受试制剂能否抵达预期的生物使用度 ，受试制剂是否能抵达与原研制剂或其他已经由临床试验证实晰清静与有用药物的生物等效 ，都应该从最最先的处方筛选、生产工艺条件以及质量研究等方面着手 ，尽可能剖析原研制剂或参比制剂的有关文献 ，以实现研究目的。
七、名词诠释
介质效应:由于样品中保存滋扰物质,对响应造成的直接或间接的影响。标准样品(Standard Sample)：在生物介质中加入已知量剖析物配制的样品 ，用于建设标准曲线 ，盘算质控样品和未知样品中剖析物浓度。
质控样品（Quality Control Sample）：质控样品系将已知量的待测药物加入到生物介质中配制的样品 ，用于监测生物剖析要领的效能和评价每一剖析批中未知样品剖析效果的完整性和准确性。一样平常配制高、中、低三个浓度的质控样品。
剖析批（Analytical run/batch）：包括待测样品、适当数目的标准样品和质控样品的完整系列。由于仪器性能的改善和自动进样器的使用 ，一天内可以完成几个剖析批 ，一个剖析批也可以一连几天完成 ，但一连丈量不宜凌驾3天。 高消融度（Highly soluble）：若药物的最大剂量能消融在 250ml 或更少的pH1-7.5的水溶液中 ，此药物可被以为是高消融度的药物。250 ml的量泉源于标准的生物等效性研究中受试者用于服药的一杯水的量。
高渗透性（Highly permeable）：渗透性的分类标准以药物在人体内的吸收水平（吸收剂量的分数 ，而不是系统生物使用度）为间接依据 ，以测定通透人体肠壁膜的量为直接依据。也可以选用能充分形貌人体内的吸收水平（如体外上皮组织细胞作育法）的非人系一切。若没有资料证实药物在胃肠道内是不稳固的 ，以质量平衡测定法为依据 ，同静脉注射给药相较量为依据 ，当药物的吸收水平抵达90%时 ，此药物可被以为是高渗透性的。
快速溶出（Rapidly dissolving）:使用划定的第一法装置 100rpm(或二法装置50rpm) ，使用900 ml或少于900 ml的下列每种介质测定溶出度：（1）0.1mol/L HCl或切合药典划定的无酶人工胃液；（2）pH 4.5的缓冲液；（3）pH 6.8的缓冲液或切合药典划定的无酶人工肠液。在上述条件下 ，若一个口服制剂在30分钟内其标示量的85%以上完全溶出 ，则此药物被以为是快速溶出的。
高变异性药物（Highly variable drug）：当某一药物的个体内变异系数（以AUC或Cmax盘算的个体内变异系数）大于或即是30%时 ，称之为高变异药物。这种变异的增添使得对样本例数可能要求增添。
八、参考文献（略）
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