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卵巢早衰动物模子

2017-07-31

会见量：

临床的卵巢早衰(POF)是指卵巢功效提前减退，常见为女性在40岁以前泛起闭经，以闭经，不育，雌激素缺乏以及促性腺激素水平升高为特征的一种疾病。在人群中发病率为1%~3%，在继发性闭经中占2%~10%，诊断以至少半年或半年以上闭经多次爆发，扫除其他原由于基础，卵巢早衰是妇科渗透领域的常见病。

卵巢早衰动物模子

POF病因多种多样，详细发病机制尚不清晰，为了寻找病因和有用的治疗要领，就必需建设与人类临床体现和发病机制相似的动物模子。海内外专家学者凭证POF的病因的多样性建设了差别的动物模子。

1、质料与要领

1.1 实验质料
雌性Wistar大鼠。

1.2 实验动物分组
本实验选用雌性Wistar大鼠40只，体重260~300 g，随机分成2组。正常比照组：20只。实验模子组：20只。

1.3 实验要领
1.3.1 POF大鼠模子制备实验模子组雌性Wistar大鼠用雷公藤多甙片(10 mg/片)，0.6 mg/(100 g?d)体重，灌胃1次/d，一连9d，建设POF动物模子。
1.3.2 组化标本制备
对实验动物用1％戊巴比妥钠(40ml/kg)腹腔麻醉后开胸，经左心室70滴/min滴入1％肝素钠的心理盐水500ml，同时剪开右心耳。继用0.1m磷酸盐缓冲液(PBS,PH=7.4)配制的牢靠液(含4％多聚甲醛)灌流牢靠。取出实验动物的卵巢组织，放入含4％多聚甲醛PBS的牢靠液中举行后牢靠约莫2h，之后将实验动物的卵巢组织切成薄片移入含20％蔗糖的PBS中。在4℃冰箱中存放，至组织薄片沉底，经水包埋，恒冷箱一连横切片，片厚20μm。经OCT包埋，恒冷箱一连切片，片厚16 μm，-70℃生涯备用。
1.3.3 尼氏染色
冷冻切片吹干，经PBS漂洗5min3次，将切片置入1%甲苯胺蓝溶液中37℃孵育90min，取出后用蒸馏水冲洗，PBS漂洗5min3次，梯度乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封片，光湿微镜下视察。

2、效果

尼氏染色效果:
正常比照组大鼠卵巢的尼氏染色切片上，卵泡数目正常，卵泡无闭锁，间质无显着增生。
实验模子组大鼠卵巢可见卵巢萎缩，卵泡数目镌汰，卵泡闭锁增多，间质增生显着。
凭证尼氏染色效果证实POF动物模子制备乐成。

3、讨论

由于POF的病因与发病机理尚不清晰，为了寻找此病的有用的治疗要领及爆发生长纪律，建设切实可靠的POF模子显得由为主要。凭证现在的种种造模效果来看，药物型POF模子简朴可靠，容易操作，可作为研究POF的模子，可是由于要领还不敷成熟，需要更进一步的探讨药物的剂量与给要时间以造出最理想的模子。为临床的治疗提供有用数据，造模子的同时，更要探讨对其他一些器官的影响。如肝、肾、神经系统等，这会对人类的康健具有更大的意义。

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卵巢早衰动物模子

1、质料与要领

2、效果

3、讨论